Povećava se imunoreaktivni tripsin

Cistična fibroza je najrasprostranjenije kongenitalno stanje koje smanjuje kvalitetu života bijelaca. Trenutno se prosječni životni vijek povećao s nekoliko godina na 30-35 godina s očekivanim životnim vijekom moderne novorođenčadi do 40 godina..

Cistična fibroza je autozomna recesivna bolest. Kod pojedinaca kavkaske rase, stopa prijenosa je 1:25 uz rođenje 1 bolesnog djeteta na 2500 rođenih. Bolest je rjeđa u ostalim etničkim skupinama.

Gen smješten na kromosomu 7 kodira protein koji se zove regulator transmembraze cistične fibroze, a koji ima nedostatak u cističnoj fibrozi. Ovaj protein je ciklični blokator kloridnih kanala ovisnih o ATP-u.

Preko 1000 različitih mutacija gena identificirano je u cističnoj fibrozi, ali mutaciju AF508 pronađene su u 75% slučajeva u Velikoj Britaniji. Mutacija gena utječe na težinu bolesti i životni vijek. Prepoznavanje mutacije gena uključenih u proces u određenoj obitelji omogućava prenatalnu dijagnozu i identifikaciju nosača u udaljenoj rodbini.

Kod cistične fibroze oslabljeni transport iona kroz epitelne stanice egzokrinih žlijezda dišnih putova i gušterače uzrokuje povećanu viskoznost sekreta. Disfunkcija znojnih žlijezda dovodi do povećane koncentracije natrija i klorida u znoju (60-125 mmol / L - s cističnom fibrozom, 10-30 mmol / L - u zdrave djece).

To je osnova najvažnijeg dijagnostičkog postupka - znojnog testa, u kojem se znojenje potiče iontoforezom pilokarpina. Znoj se skuplja u posebnoj kapilarnoj cijevi ili upija na utegnuti komad filtrirnog papira. Ako nije prikupljeno dovoljno znoja, često se pojave dijagnostičke pogreške, pa test treba obaviti iskusno osoblje. Gusta i viskozna sluz nije jedina osnova za patogenezu.

Kliničke karakteristike cistične fibroze:

• Novorođenčad.
- Dijagnosticira se pregledom novorođenčadi.

• Dojenčad.
- Mekonijski ileus u neonatalnom razdoblju.
- Produljena neonatalna žutica.
- Poremećaj u razvoju.
- Ponavljajuće infekcije dišnih putova.
- Malapsorpcija, steatoreja.

• Mlada djeca.
- bronha.
- Relakt prolapsa. - Polipi nosa.
- Upala sinusa.

• Starija djeca i adolescenti.
- Alergijska bronhopulmonalna aspergiloza.
- Dijabetes melitus (često ovisan o inzulinu). - Ciroza jetre i portalna hipertenzija.
- Distalna opstrukcija crijeva.
- Pneumotoraks ili rekurentna hemoptiza. - Neplodnost kod muškaraca.
- Povećanje psiholoških problema.

U našoj zemlji novorođenčad se pretražuje na cističnu fibrozu. Klinički većina djece s cističnom fibrozom koja je prisutna s malapsorpcijom ili poteškoćama u razvoju pri rođenju, praćena ponavljajućim ili dugoročnim infekcijama dišnih putova.

U plućima (mali dišni putovi) viskozni sluz predisponira za kronične infekcije, u početku uzrokovane Staphom. aureus i H. Influenzae, a kasnije i Pseudomonas aeruginosa. To dovodi do oštećenja bronhijalnog zida, stvaranja bronhiektazije i apscesa. Dijete ima stalan neuništivi produktivni kašalj s gnojnim ispljuvak. Fizikalnim pregledom otkriva se oticanje prsnog koša zbog mehanizma "zamka zraka", bruto inspiratorni krepitus i / ili piskanje.

Uz dugotrajnu bolest, dijete deformira prste u obliku "bubnjića". Kao rezultat toga, 95% bolesnika s cističnom fibrozom umire od zatajenja disanja.

Više od 90% djece s cističnom fibrozom ima nedovoljnu egzokrinu funkciju gušterače (nedovoljno izlučivanje lipaze, amilaze i proteaze), što izaziva probavu i malapsorpciju. To dovodi do poremećaja u razvoju, česte masne stolice (steatorreja) blijede boje, vrlo neugodnog mirisa i velikog volumena. Insuficijencija gušterače može se dijagnosticirati potvrđivanjem niske elastaze stolice.

Oko 10-20% djece s cističnom fibrozom primljeno je tijekom neonatalnog razdoblja s reverzibilnom crijevnom opstrukcijom. Zgušnjivani mekonij uzrokuje crijevnu opstrukciju povraćanjem, natečenjima i nemogućnošću izlučivanja mekonija tijekom prvih nekoliko dana života. Početna terapija je primjena gastrographina u klistirima, ali operacija je indicirana u većini slučajeva.

Procjena tinejdžera s cističnom fibrozom

- Ako su braća i sestre bili bolesni - bolest je autosomno recesivna
- Slani znoj po vrućem vremenu može dovesti do dehidracije
- Centralni venski kateteri, kao što je Portachat, ubačeni su za intravenozne antibiotike, dok aktivno liječe infekciju

- Grudi - važni su sljedeći simptomi:
• oticanje zbog mehanizma "zamka zraka";
• Harrisonova brazda;
• brzi udisajni crepitus i / ili izdisanje koljena;
• infekcije dišnih puteva

- Bubnjevi prsti
- Ožiljak nakon operacije za mekonijski ileus u neonatalnom razdoblju (10-20%)

- Moguće komplikacije treba pratiti:
• nosni polipi, sinusitis, rektalni prolaps;
• alergijska bronhopulmonalna aspergiloza;
• dijabetes melitus (često ovisan o inzulinu);
• ciroza jetre i portalna hipertenzija;
• sindrom distalne opstrukcije crijeva (analog mekonijskog ileusa)
• pneumotoraks ili rekurentna hemoptiza;
• moguća neplodnost kod muškaraca

- Sputum - dokaz infekcije, akutne ili kronične, uzrokovane Pseudomonas ili Burkholderia cepacia

- Rast:
Normalan rast je cilj

- Prehrana:
• Gastrostomska cijev za hranjenje tijekom noći kako bi se osigurale dodatne kalorije Nedostatak egzokrinih funkcija gušterače:
• prima dovoljno nadomjesne terapije enzimom gušterače;
• dobiva vitamine topive u mastima

- Procjena respiratornog problema:
• Spirometrija - ako se pogoršava
• Vježbe kontinuiranog disanja?
• Fizioterapija ili gimnastika?
• Je li bronhodilatacijska terapija optimalna??
• Infekcije respiratornog trakta - akutne ili kronične - i njihovo liječenje?
• Antibiotici protiv Pseudomonas putem nebulizatora i DNaze?
• Izbjegava li se neposredni kontakt s pacijentima koji nisu članovi obitelji?

- Cjelokupna ocjena:
• pohađanje škole i radni učinak;
• posebni problemi liječenja bolesti;
• psihološke potrebe

Pregled novorođenčadi na cističnu fibrozu

Pregled novorođenčadi na cističnu fibrozu poboljšava rad pluća u djetinjstvu, smanjuje pothranjenost i poboljšava neuropsihički razvoj. Skrivanje svih novorođenčadi na cističnu fibrozu kod nas se svakodnevno provodi rutinski. Bolesnici s cističnom fibrozom imaju povišenu razinu imunoreaktivnog tripsina, što se može izmjeriti standardnim uzorkom pete uzetim za biokemijski pregled svih dojenčadi (Guthrie test). Zatim se testiraju uzorci s povećanom razinom imunoreaktivnog tripsina na uobičajene mutacije gena u cističnoj fibrozi, a djeci s dvije mutacije daje se znojni test kako bi se potvrdila dijagnoza. Postavljanje dijagnoze u neonatalnom razdoblju omogućuje rano započinjanje redovitog liječenja. To također omogućuje rano genetsko savjetovanje roditelja i informiranje o riziku ponovnog rođenja takvog djeteta 1: 4 i mogućnosti prenatalne dijagnoze u sljedećoj trudnoći..

Dijagnoza cistične fibroze treba biti isključena kod svakog djeteta s ponavljajućim infekcijama, labavom stolicom ili poteškoćama u razvoju.

Neonatalni probir

Dijagnoza cistične fibroze danas je omogućena skriningom novorođenčadi koji se obavlja u većini regija Italije. Riječ "screening" (s engleskog - "češalj") znači ispitivanje svih zdravih ljudi radi prepoznavanja nekih skrivenih i značajnih bolesti. Svrha neonatalnog probira je identificirati određene bolesti koje se, ako se otkriju rano, mogu liječiti izvrsnim rezultatima. To su bolesti koje su prisutne već od rođenja, ali se mogu pojaviti u prvim mjesecima života, to su bolesti poput fenilketonurije, urođene hipotireoze i cistične fibroze. Ako kod fenilketonurije (1 slučaj u 20.000 novorođenčadi) i urođene hipotireoze (1 od 2.500), rano otkrivanje omogućava rano liječenje i dovodi do oporavka, tada kod cistične fibroze probir omogućuje rano i pravovremeno liječenje, koje, iako ne vodi oporavku, međutim, može produljiti život i poboljšati njegovu kvalitetu. Neonatalni probir temelji se na određivanju razine određenog proteina u krvi, enzima gušterače - tripsina (test na imunoreaktivni tripsin ili IRT). Razina tripsina određuje se u kapi krvi uzetom iz pete na blotting papiru 3. - 4. dana od rođenja. Ako razina RTI prelazi određeni normalan prag (to je određeni pokazatelj za svaki probirni laboratorij), tada se sumnja na prisutnost bolesti. U tom se slučaju u većini laboratorija genetski test provodi na drugoj osušenoj kapi krvi prije uznemiravanja djetetove obitelji. Ako se genetskom analizom utvrdi prisustvo dviju mutacija u CFTR genu, tada je dijagnoza cistične fibroze neosporna. U drugim centrima, ako je rezultat testa 10 pozitivan za IRT, roditelji s djetetom pozvani su na ponovnu analizu za IRT (obično u 20-30 dana života): ako je rezultat normalan, onda je pitanje zatvoreno, ako je opet pozitivno, tada se provodi znojni test i, možda, genetska istraživanja. Obično je test znojnice presudan za dijagnozu, čak i ako su prethodno identificirane dvije CFTR mutacije. Ako znojni test ukaže na prisutnost cistične fibroze, obično se organizira kratka hospitalizacija djeteta kako bi se utvrdile karakteristike bolesti (stupanj uključenosti u proces pluća, prisutnost ili odsutnost gušterače, itd.) I propisali program liječenja.

Što znači pozitivan rezultat probira??

Pozitivan rezultat probira pokazuje da postoji sumnja na cističnu fibrozu. Ovu sumnju možemo naknadnim istraživanjima potvrditi ("istinski pozitivno") ili odbaciti ("lažno pozitivno"). U stvari, neonatalni probir na cističnu fibrozu daje određeni broj pozitivnih rezultata kod savršeno zdrave djece: od svaka 3-6 slučajeva pozitivnog rezultata, samo se jedan ispostavi da je stvarno bolestan od cistične fibroze, a ostali su lažno pozitivni rezultati. To je zato što povećana razina tripsina u krvi nije usko specifičan pokazatelj cistične fibroze i može se povećati ne samo cističnom fibrozom ili biti povišena pri rođenju, ako je dijete zdravo, normalizira se tijekom sljedećih dana ili tjedana. Naprotiv, u bolesnika s cističnom fibrozom ostaje povišen dugo, mjesecima. Stoga su potrebne dubinske ankete koje su gore spomenute. Jedno od njih su genetska istraživanja. Može otkriti prisutnost mutacija u CFTR genu bez određivanja njihovog broja - jedne ili dvije. Ali ako postoji samo jedna mutacija, dijete može biti samo zdrav nositelj, ali ako postoje dvije mutacije u CFTR genu, dijete će nesumnjivo biti bolesno, a za potvrdu konačne dijagnoze potreban je znojni test. Stoga je tako važno izvršiti znojni test što je brže moguće kako biste osigurali sigurnost, uvjerili roditelje i, ako je potrebno, započeli odgovarajući tretman..

Što znači negativan rezultat probira??

Negativni rezultati probira pokazuju da tripsin test nije podigao sumnju na cističnu fibrozu. To gotovo uvijek ukazuje na odsutnost cistične fibroze ("pravi negativni" rezultat). Djeca s "pravim negativnim" predstavljaju veliku većinu slučajeva. Međutim, rijetki su „lažno negativni“ rezultati tijekom probira. Nemoguće je sigurno reći, ali u 3-5% bolesne djece tijekom pregleda nije prepoznata. Riječ je o djeci s cističnom fibrozom, kod koje test na tripsin nije pokazao prisutnost bolesti, ali dijagnoza se postavlja u kasnijim godinama života, na temelju manifestacija koje omogućuju sumnju na prisutnost bolesti. Dakle, ako je rezultat probira negativan, velika je vjerojatnost da dijete ima cističnu fibrozu, ali u teoriji još uvijek postoji mala vjerojatnost za to, a ako postoje sumnjivi znakovi, uvijek je bolje napraviti znojni test..

Što je genetsko istraživanje?

Sastoji se u činjenici da se uzima mala količina krvi (dovoljna je kap krvi uzeta tijekom neonatalnog probira). DNK se izdvaja iz krvi i vrši se njegova genetska analiza (= traženje mutacija u CFTR genu). Ispitivanje se provodi kako bi se potvrdila dijagnoza cistične fibroze: dijagnoza se potvrđuje kada su identificirane dvije mutacije CFTR-a (mogu biti iste ili dvije različite). Kako ovaj test ne može otkriti sve mutacije u CFTR genu, događa se da je otkrivena samo jedna mutacija. U tim je slučajevima rezultat znojnog testa presudan za dijagnozu cistične fibroze. Određivanje mutacije gena CFTR ne omogućuje određivanje prognoze tijeka bolesti u djeteta. Međutim, neophodno je ako roditelji djeteta žele provesti prenatalnu dijagnostiku tijekom sljedeće trudnoće. Također je potrebno za točno prepoznavanje zdravih nositelja mutacije među pacijentovim neposrednim srodnicima..

Screening na cističnu fibrozu

Vrijeme čitanja: min.

Pregledom cistične fibroze u rodilištu cilj je identificirati bolest i prije nego što se pojave klinički znakovi. Njegova glavna zadaća je rano otkrivanje bolesne djece i pravovremeno imenovanje odgovarajuće terapije..

Naziv uslugeCijena
Zaliha! Početno savjetovanje s reproduktologom i ultrazvukom0 rub.
Primarna konzultacija s reproduktologom, dr. Sc. Osina E.A..10 000 RUB.
Konzultacije genetičara putem Skypea ili telefona2 500 rubalja.
Ponovljena savjetovanja genetičara2 500 rubalja.
Početno savjetovanje s genetičarom (savjetovanje s genetičarom - prepoznavanje rizika od rođenja djeteta sa nasljednim bolestima)3.500 rubalja.
Konzultacije genetika pred PGD-om3 300 rub.
Vistara test (Natera)78.000 RUB.
Vistara test u suradnji s Panorama Basic (Natera)95 550 rbl.
Vistara test u kombinaciji s proširenom panoramom (Natera)107 250 rub.
Neinvazivni prenatalni pregled fetusa na aneuplodiju (PANORAMA)33 900 rub.
Neinvazivni prenatalni pregled fetusa na aneuploidije + panel mikrodelezija (PANORAMA)47 500 rub.
Citogenetska studija materijala za pobačaj (24 kromosoma, aGGH)15.000 rubalja.
ANORA test citogenetska analiza pobačaja (Natera)53.200 RUB.
Prenatalni kompleks 10-13 tjedana (besplatna b-podjedinica humanog korionskog gonadotropina (slobodni b-hCG, slobodni b-hCG)2 100 rubalja.
Prenatalni kompleks 14-20 tjedana (Ljudski korionski gonadotropin (hCG, beta-hCG, b-hCG, humani korionski gonadotropin, HCG)2 400 rub.
Ploča horizonta 4 (Natera)27 300 rub.
Horizontalna ploča 27 (Natera)31.200 RUB.
Ploča Horizon 106 (Natera)42 900 rub.
Ploča Horizon 274 (Natera)50 700 rub.
Preliminarni stadij PGT za nosioce monogenih mutacija (krv s EDTA)112.500 rubalja.
PGT monogene bolesti (do 8 embriona)187.000 rubalja.
PGT za 24 kromosoma tijekom PGT-a monogene bolesti (1 zametak)20 000 rubalja.
Predimplantacijsko genetsko testiranje za 24 kromosoma (1 zametak) bez genetske konzultacije na temelju rezultata PGT-a23.000 rubalja.
Preimplantacijska brza genetska dijagnoza za 24 kromosoma (1 zametak)48.000 rubalja.
Predimplantacijsko genetsko testiranje na 24 kromosoma - za svaki dodatni zametak, počevši od 320 000 rubalja.
Predimplantacijsko genetsko testiranje 24 kromosoma + translokacija (do 2 embrija)72.000 rubalja.
Predimplantacijsko genetsko ispitivanje 24 kromosoma + translokacija (za svaki dodatni zametak, počevši od 3)35.000 rubalja.
Predimplantacijsko genetsko ispitivanje zakržljalih embrija60.000 RUB.
Priprema embrija za ponovljeno genetsko ispitivanje10 780 rub.

Ova metoda temelji se na utvrđivanju razine imunoreaktivnog tripsina (IRT) u suhom mjestu kapilarne krvi novorođenčadi. Za razliku od prenatalnog probira, provodi se nakon rođenja djeteta. Trenutno je neonatalni skrining obavezan postupak za novorođenčad. Screening na cističnu fibrozu može se potvrditi u različitim fazama ove dijagnoze. Prva faza je uzimanje krvi s pete (na posebnom filter papiru) novorođenčeta na 4-7 dana života. Zatim se u osušenom mjestu krvi izračunava sadržaj imunoreaktivnog tripsina na posebnom ispitnom uzorku. Normalnim očitavanjem može se smatrati 65-70ng / l. Ako su ovi pokazatelji premašeni 5 ili čak 10 puta, možemo govoriti o prijelazu u drugi stupanj dijagnostike cistične fibroze bolesti. Neonatalni skrining druge faze provodi se 21. do 28. dana djetetovog života. Ova faza je ponavljanje prvog. Uzorak krvi uzima se i djetetu kako bi se odredio imunoreaktivni tripsin. Obično, očitanja u ovom životnom razdoblju ne bi smjela prelaziti 40ng / l. Ako je probir za cističnu fibrozu pozitivan, tada je potreban treći stadij. U ovoj je fazi potrebno provesti znojni test i genetske testove. Budući da tijekom ovih testova može doći do lažno pozitivnih rezultata. Treća faza omogućit će liječnicima da potvrde ili negiraju mogućnost postavljanja ove dijagnoze. Lažne indikacije mogu se pojaviti u sljedećim uvjetima:

  • drugi je pregled bio kasniji od roka dospijeća (21-28 dana života);
  • s fetalnom hipoksijom;
  • s intrauterinim infekcijama;
  • pokazatelj nije uvijek informativan za mekonij ileus;
  • povećava se razina imunoreaktivnog tripsina, a s bubrežnim zatajenjem, crijevna atrezija.

Prvi simptomi cistične fibroze pojavljuju se 6 mjeseci nakon rođenja, kada dijete prelazi na umjetno hranjenje (hranjive tvari i zaštitne tvari sadržane u majčinom mlijeku privremeno zaustavljaju razvoj bolesti). Poraz gušterače dovodi do nedostatka probavnih enzima, uslijed čega se hrana ne probavlja, a gnojni procesi prevladavaju u crijevima. Oslabljena apsorpcija hranjivih sastojaka dovodi do hipovitaminoze, retardacije u fizičkom razvoju, distrofičnih promjena u raznim organima i tako dalje.

Normalna očitanja su brojevi uzoraka od najviše 40 mmol / l. S povećanjem rezultata za uzorke cistične fibroze, probir se nastavlja u četvrti stadij. Provodi se s povećanjem rezultata testa znojenja s 40 na 60 mmol / l. U tom je slučaju dodijeljena DNK dijagnostika za 10-20 mutacija uobičajenih u neposrednom području. Ako je rezultat znojnog testa nedvosmisleno pozitivan, gdje vrijednosti prelaze 60 mmol / l, dijagnoza se potvrđuje. Dijete je prijavljeno u najbližem centru za cističnu fibrozu.

Ako bolest nije potvrđena, takvo se dijete promatra godinu dana, a zatim se provode ponovljeni testovi znoja i propisuje se analiza izmeta na elastazu-1..

Također se provodi prenatalna dijagnoza cistične fibroze koja se temelji na genetskom savjetovanju i pregledu roditelja, te genetskom istraživanju stanica dobivenih amniocentezom.

Različite metode ispitivanja funkcije gušterače

Serumski imunoreaktivni tripsin, inhibitori tripsina, tripsin

Od velike važnosti u dijagnozi pankreatitisa je određivanje aktivnosti tripsina u krvnom serumu, koje proizvode samo akinarne stanice gušterače. Dakle, ovaj enzim je specifičan za gušteraču.

Sadržaj imunoreaktivnog tripsina u krvnom serumu može se točno odrediti radioimunološkom analizom. Ovu je metodu detaljno opisao T.P. Wood, ali njegova klinička primjena je ograničena, jer je prikupljeno iskustvo pokazalo da mjerenje aktivnosti tripsina u serumu nije dovoljno osjetljivo za njegovu uspješnu uporabu kao dijagnostički test na CP. Postoje dokazi da se u velikom broju slučajeva OP i pogoršanja CP aktivnosti enzima u krvi mogu povećati 20-70 puta.

Mala pouzdanost studije posljedica je vezanja aktivnog tripsina na inhibitore - a1-antitripsin i a2-makroglobulin. U isto vrijeme, antitijela sadržana u odgovarajućim dijagnostičkim setovima slabo "prepoznaju" tripsin u kombinaciji s inhibitorima. To objašnjava činjenicu da je specifičnost testa veća od 95%, a osjetljivost samo 40%. U kliničkoj praksi učestalost lažnih negativnih rezultata prilično je visoka, pa se ovaj test smatra nezadovoljavajućim..

Povećanje razine imunoreaktivnog tripsina pronađeno je kod kroničnog zatajenja bubrega, hiperkorgicizma, karcinoma gušterače, kalkuloznog holecistitisa. Niski pokazatelji aktivnosti imunoreaktivnog tripsina specifični su za egzokrinu insuficijenciju gušterače. Monotonska krivulja dinamike aktivnosti enzima nakon opterećenja hranom posebno je karakteristična u eksperimentalnim i kliničkim studijama..

Brojni autori predlažu korištenje određivanja aktivnosti imunoreaktivnog tripsina u krvi kao probirni test za dijagnozu egzokrine insuficijencije gušterače u bolesnika s dugotrajnim CP-om s ishodom u fibrozi organa. Međutim, smanjenje pokazatelja može se zabilježiti kod karcinoma gušterače. Kako bi se smanjila učestalost pre negativnih rezultata istraživanja na CP, predloženo je da se utvrdi aktivnost enzima i njegovih inhibitora nakon stimulacije cerulsinom, pankreosiminom ili opterećenjem hranom.

Određivanje sadržaja inhibitora tripsina u krvnom serumu koristi se i za dijagnozu pankreatitisa, međutim, njihovi su pokazatelji višesmjerni, a jasna interpretacija rezultata nije uvijek moguća. Porast razine inhibitora tripsina u krvi često ukazuje na mobilizaciju inhibicijskog sustava u plazmi, što uzrokuje pseudo-normalne parametre tripsine. Suprotno tome, nizak sadržaj inhibitora plazme obično ukazuje na njihovu aktivnu potrošnju, smanjenje kapaciteta ili iscrpljivanje obrambenih mehanizama tijekom ozbiljnog uništavanja gušterače. Istodobno, svi omjer inhibitora proteaze u serumu ne odražava one u tkivu gušterače, pa stoga ne mogu liječnika obavijestiti o obliku, ozbiljnosti i, u nekim slučajevima, potvrdi dijagnoze pankreatitisa.

Trippsinogen koji cirkulira u krvi dijeli se na polaritet kagionski i anionski. Normalni omjer ovih oblika u serumu je 2: 1. Kod pankreatitisa dolazi do izraženijeg porasta u krvi anionskog oblika tripsinogena.

Posljednjih godina objavljeni su podaci o dovoljnom sadržaju informacija za određivanje sadržaja trippsinogena u urinu. Osjetljivost i specifičnost određivanja razine tripsin-2 u urinu u diferencijalnoj dijagnozi OP i akutne trbušne patologije ne-pankreasnog porijekla doseže 91-95%, odnosno 95-99%.

Serumska lipaza i fosfolipaza

Hiperlipasemija se ne smatra strogo specifičnom za patologiju gušterače, kao što se javlja i kod drugih gastrointestinalnih bolesti. Unatoč tome, porast aktivnosti lipaze u krvi dvostruko je specifičan za pankreatitis od hiperamilamije. Doista, hiperlipasemija nije otkrivena u upala slijepog crijeva, ektopična trudnoća, parotitis, rak pluća, ali ona se bilježi u 60% bolesnika s bolestima hepatobilijarnog sustava, s crijevnom opstrukcijom, zatajenjem bubrega, rakom prostate i drugim bolestima pankreasa. Nemoguće je utvrditi težinu trenutnog pogoršanja pankreatitisa i trenutnu prognozu aktivnostom lipaze u serumu. Preciznije, smanjenje aktivnosti enzima u krvi s fibrozom gušterače koja je posljedica CP i cistične fibroze.

Posljednjih godina veliko je značenje u dijagnozi pankreatitisa, u određivanju prognoze i vjerojatnosti komplikacija pripisano proučavanju aktivnosti fosfolipaze A2 u krvi i urinu. To je zbog činjenice da on igra ključnu ulogu u patogenezi pankreatitisa zbog tropizma za lipidima staničnih membrana i sposobnosti da uzrokuju njihovo oštećenje. Uz to, fosfolipaza A2, odvajajući masnu kiselinu iz lecitina, potiče stvaranje lizolecitina, koji prilikom ulaska u GLP izaziva edeme za nekoliko minuta, a nakon nekoliko sati - nekrozu parenhima gušterače. Zbog toga se povećanje aktivnosti fosfolipaze u krvi smatra idealnim pokazateljem destruktivnih procesa..

Rezultati niza studija ukazuju na visoku osjetljivost (do 100%) i specifičnost (do 90%) u određivanju aktivnosti fosfolipaze A2 tipa I u krvi u pankreatitisu, budući da se smatra enzimom specifičnim za gušteraču. Dokazano je da porast njegove aktivnosti u krvi dolazi ranije i traje dulje od povećanja aktivnosti ukupne amilaze, pankreasne izoamilaze, imunoreaktivnog tripsina i lipaze, a razina hiperfosfo-lipasemije korelira s težinom pogoršanja CP.

Razvijene su osjetljivije - imunofluorometrijske i radioimunološke metode za proučavanje aktivnosti enzima. Omogućuju određivanje ne samo ukupne frakcije fosfolipaze A2, već i aktivnosti proenzima i aktivnog enzima. Uz pogoršanje CP, omjer između njih oštro se mijenja prema povećanju aktivnosti fosfolipaze.

Određivanje aktivnosti fusfolipaze A2 prvog tipa u krvi smatra se osjetljivim u odnosu na egzokrinu insuficijenciju gušterače, jer stupanj smanjenja aktivnosti enzima u krvi korelira s parametrima sekreta-pankreozmin testa.

Elastaza u serumu-1

Postoje tri vrste elastaza: gušterača gušterače prvog i drugog tipa i neutrofilna elastaza. Iako ovi enzimi imaju slična kemijska svojstva, oni se značajno imunološki razlikuju, što omogućava da se odvoje zasebno. Trenutno se koristi ispitivanje imunogorbensa povezanog s enzimom (EL1SA - ispitivanje imunosorbenta povezanog enzimom). Na taj je način moguće odrediti aktivnost prve vrste elastaze u bilo kojoj biološkoj tekućini, ali trenutno se za realizaciju enzimske aktivnosti stvaraju samo setovi u krvi koji omogućuju procjenu fenomena evazije enzima u OP.

Aktivnost ovog enzima u krvi povećava se kod pankreatitisa ranije nego aktivnost drugih enzima i zadržava se duže. Određivanje aktivnosti elastaze prvog tipa smatra se najviše "kasnim" osjetljivim testom za dijagnosticiranje pogoršanja CP, jer povećana razina u krvi traje 8-10 dana nakon napada. Tijekom tog razdoblja, aktivnost elastaze tipa I povećava se u 100% bolesnika, razina lipaze - u 85%, imunoreaktivni tripsin - u 58%, pankreasna izoamilaza - u 43%, ukupna os-amilaza - u 23% bolesnika.

Podaci o specifičnosti hiperelastasemije su kontradiktorni. Postoji mišljenje da aktivnost enzima ne odgovara stupnju uništenja tkiva gušterače i nije od velike dijagnostičke vrijednosti u funkcionalnoj insuficijenciji u bolesnika s dugoročnim CP..

Rijetko otkriveni enzimi gušterače

Rjeđe, određivanje aktivnosti enzima u krvi se upotrebljava: karboksipeptidaza A i B, dehidrogenaze, nukleaza, glutation transferaza, hijaluronat endoglucoaminidase, glipinamide, inotransferase, kolesterol esteraze, katepsini B, D i L, i drugo, metode za proučavanje svoju aktivnost u biološkim tekućinama je teško i kompleksno. Sadržaj dijagnostičkih informacija ovih ispitivanja ne opravdava uvijek složenost i troškove njihovog izvođenja. Određivanje sadržaja proteina povezanog s pankreatitisom u krvi i urinu smatra se obećavajućim. Stol 2-9 sumiraju podatke o osjetljivosti i specifičnosti određivanja aktivnosti niza enzima gušterače na temelju rezultata istraživanja većine autoritativnih centara i autora..

Tabela 2-9. Dijagnostička vrijednost određivanja različitih markera u dijagnozi akutnog pankreatitisa

Br. AN25TLI, imunoreaktivnost slična tripsinu, TLI

Period izvršenja

3 radna dana (plus 1-2 dana za regije)

Studijski materijal

Metoda određivanja

Ispitivanje imunoreaktivnosti sličnog tripsinu (TLI) seruma u krvi je metoda za vrstu specifičnu dijagnozu egzokrine insuficijencije gušterače (ENPI), provedena korištenjem enzimske imunoanalize.

Studija koristi protutijela specifična za vrste koja se nalaze u krvnom serumu, kao i kationski tripsin i tripsin (zimogen ili neaktivni tripsin zimogen) koji su povezani s inhibitorom proteinaze.

Trippsinogen se sintetizira i skladišti u akinarnim stanicama gušterače, a u fiziološkim uvjetima u malim količinama pušta se u vaskularni ležaj. Trippsinogen se pretvara u tripsin u tankom crijevu i aktivni je oblik proteolitičkog enzima. Trippsinogen i tripsin se ne apsorbiraju iz crijeva. Dakle, serumski TLI odražava stvarno oslobađanje tripsinagena izravno iz gušterače. Trippsin i tripsingen su vrlo slični, testom TLI mogu se otkriti oba enzima u serumu. Analiza također otkriva dio tripsina koji je reverzibilno vezan za α inhibitor. Sve to objašnjava i naziv ove studije..

EPI sindrom razvija se kao rezultat smanjenja broja akinarnih stanica gušterače, što se često događa s acinarskom atrofijom gušterače (nasljedna predispozicija kod njemačkih ovčara) ili kroničnim pankreatitisom. Smanjenje acinarnih ćelija dovodi do smanjenja sinteze i oslobađanja triptozinogena u crijevima i u krv te do smanjenja serumskog TLI. Klinički znakovi EPI obično se ne razvijaju sve dok se funkcionalna sposobnost gušterače ne smanji na 10-15% od normalne.

TLI test koristan je za razlikovanje maldigestije od primarne malapsorpcije i trebao bi biti dio rutinske studije za pseći proliv tankog crijeva. EPI treba isključiti prije razmatranja dijagnoze primarne bolesti crijeva. U većini slučajeva TLI se značajno smanjuje u EPI u usporedbi sa zdravim psima ili psima s crijevnom malapsorpcijom..
Studija TLI, prvotno predložena za dijagnozu EPI kod pasa, može se upotrijebiti kao pomoćni test za sumnju na pankreatitis (u nedostatku bubrežne bolesti). Visoke vrijednosti TLI obično se otkriju kod pankreatitisa. Međutim, ovo istraživanje nije tako informativno u dijagnozi pankreatitisa kao određivanje pankreasne lipaze kod pasa. Specifičnost je pronađena na 65%, ali osjetljivost je samo 33%. Osjetljivost ove metode smanjuje se, vjerojatno, kratkim poluživotom ispitivanih enzima. Vrijednost TLI može se vratiti u normalu u roku od nekoliko sati nakon početka pankreatitisa. Najveća vrijednost TLI utvrđuje se kad se pojave klinički znakovi pankreatitisa. U kroničnom pankreatitisu, koncentracija enzima u serumu možda nije dovoljna za otkrivanje. Neki psi s pankreatitisom mogu imati povišen TLI s normalnom razinom lipaze gušterače, a normalan TLI ne isključuje pankreatitis, što sugerira da su potrebna oba..

Da bi se dobili točniji rezultati, životinje trebaju biti na dijeti gladovanja najmanje 12 sati prije testiranja..
Uzorak je stabilan 1 tjedan na temperaturi skladištenja od + 2 ° C... + 8 ° C; ostaje stabilna 2 mjeseca kada se smrzne na -17C... -23C.

Rezultati studije sadrže podatke isključivo za liječnike. Dijagnoza se postavlja na temelju sveobuhvatne procjene različitih pokazatelja, dodatnih informacija i ovisi o dijagnostičkim metodama.

VET UNION laboratorijske jedinice: ng / ml.

Pregled na cističnu fibrozu: prepoznavanje opasne monogenske patologije koja je asimptomatska

Screening na cističnu fibrozu (cistična fibroza) jedini je način da saznamo o abnormalnom razvoju proteina odgovornog za ispravan transport iona klora do organa koji stvaraju razne sekrete: znoj, sluz, slju, probavne sokove i tekućine, neophodne za začeće potomstva čak i u fazi asimptomatskog tijeka ova autozomna recesivna nasljedna bolest.

Unatoč činjenici da je ova bolest povezana s ozbiljnom disfunkcijom najvažnijih sustava tijela, kao što su gušterača, crijeva, bronhi i pluća, jetra, izlučevine i genitalije, mnoge mutacije gena CFTR uzrokuju različite simptomatske oblike koji se ne moraju nužno manifestirati u djece i mladost. Dakle, ako pacijent ima blagi oblik genetske patologije, karakteristični znakovi mogu biti ili ne izraženi i slični drugim bolestima ili uopšte izostati.

Pored toga, ovom metodom ispitivanja treba obratiti pažnju na ljude s opterećenom nasljednošću, koji su imali rodbinu u obitelji koji su patili od kroničnih bolesti s dijagnozom bronhijalne astme, crijevne opstrukcije, neplodnosti, pankreatitisa i ciroze jetre, kao i onima koji nisu živjeli do 40 godina. Doista, kao što pokazuje praksa, pacijenti s monogenom CFTR patologijom ne žive do 35-40 godina. Prolazak analiza i posebnih testova važno je za takve ljude jer mogu biti nositelji nepovoljnog mutacijskog gena, što povećava rizik od njegovog prenošenja na buduće generacije..

Mora postojati program cistične fibroze

Danas je provera cistične fibroze u rodilištu obavezan postupak koji je dio skupa saveznih mjera za borbu protiv genetskih patologija. A novopečeni roditelji su sigurno upoznati s IRT / DNK testom, kada se iz djetetove pete odvoji kap krvi koja se osuši, nakon čega liječnici određuju razinu enzima imunoreaktivnog tripsina po njemu.

Ako je prva faza pregleda, koja se obično provodi 4-5. Dan bebe u rodilištu, pokazala negativan rezultat, to jest, broj IRT-a ne prelazi normu od 65-70 ng / ml, dijete se smatra uvjetno zdravim.

Screening na cističnu fibrozu kod novorođenčadi, kod kojih je enzim gušterače 5-10 puta veći od norme, prelazi se u drugi stupanj, koji se provodi strogo od 21 do 28 dana života malog pacijenta. U ovoj fazi provodi se ponovljeno uzimanje krvi i ispitivanje kvantitativnog sadržaja IRT-a. Normativni pokazatelj za zdravu djecu ovog razdoblja života nije veći od 40 ng / mg. Ako nakon toga, analize vašeg djeteta potvrde aktivnost imunoreaktivnog tripsina, liječnici šalju roditelje s djetetom da uzmu uzorke znoja. To je potrebno kako bi se potvrdila ili isključila monogena mutacija, budući da porast razine IRT-a kod beba može biti rezultat različitih patologija, uključujući:

  • fetalna hipoksija;
  • intrauterine infekcije;
  • konjugacijska žutica;
  • perinatalni stres;
  • kromosomska preuređenja.

Do danas su samo uzorci znoja najtačniji način dijagnosticiranja cistične fibroze u dojenčadi i djece mlađe od 2 godine. Nadalje, moraju se provesti barem 2-3 puta, jer se pokazatelji u različitim razdobljima ispitivanja mogu razlikovati.

Razlike između neonatalne i prenatalne dijagnoze

Ove dvije metode otkrivanja mutacijskog gena bitno se razlikuju jedna od druge u tome što prenatalni pregled može otkriti bolest već u fazi razvoja fetusa, a neonatalni probir cistične fibroze uključuje otkrivanje potencijalne opasnosti nakon što se dijete rodi u prvim mjesecima svog života..

Osim toga, takve dijagnostičke metode djeluju s različitim vrstama analiza. Za prenatalnu dijagnozu ispituje se slina i krv roditelja, kao i horionska biopsija i amniopunktura.

Tijekom primjene NS za cističnu fibrozu, stručnjaci iz različitih laboratorija i medicinskih centara usredotočeni su na različite istraživačke taktike. Na primjer, u Europi i SAD-u, analiza RTI smatra se neučinkovitom u kontekstu velike mješavine velikog broja nacionalnosti. Stoga koriste alternativnu metodu - otkrivanje proteina pankreatina (PAP), koji se može izolirati ili kombinirati s povećanom razinom enzima gušterače. Na temelju ove tehnike liječnici su razvili poseban komplet za procjenu PAP + IRT-a koji uspješno koriste liječnici iz vodećih ruskih klinika..

Mnogi roditelji postavljaju pitanje: "Što ako je NS potvrdio prisutnost cistične fibroze?" Iskusni stručnjaci preporučuju da se odmah obratite liječniku uskog profila koji ima veliko iskustvo u liječenju monogenih mutacija. To će skratiti razdoblje psihološke prilagodbe novopečenih roditelja na stanje njihove bebe i pružiti stručnu pomoć u kratkom vremenu. Ako novorođenče ne doživi pogoršanje patologije, dovoljno je da roditelji tijekom prva tri mjeseca djetetova života svaka dva tjedna dolaze kod liječnika. Od godine dana posjećivanja stručnjaka postaju rjeđa - jednom tromjesečno. Ono što je najvažnije, u razdoblju do 2 godine, kada je rizik od pogoršanja simptoma najveći, pažljivo pratite zdravlje vašeg djeteta i pridržavajte se učinkovite strategije liječenja koju je propisao pedijatar.

Što je tripsin u analizi krvi i izmeta?

Trippsin je proteolitički enzim (enzim) koji se izlučuje egzokrinim dijelom gušterače. Prvo, njegov prekursor nastaje u neaktivnom stanju - tripsin.

Ulazi u dvanaesnik, a tamo se aktivira zbog djelovanja drugog enzima na njega - enterokinaze.

Tripsin je prema kemijskoj strukturi klasificiran kao protein. U praksi se dobiva od goveda..

Trippsinske funkcije

Najvažnija funkcija tripsina je proteoliza, tj. cijepanje proteina i polipeptida na manje komponente - aminokiseline. To je katalitički enzim.

Drugim riječima, razgrađuje bjelančevine tripsinom. Poznati su i drugi enzimi gušterače - lipaza koja sudjeluje u probavi masti i alfa-amilaza koja razgrađuje ugljikohidrate. Amilaza nije samo enzim gušterače, već se sintetizira i u pljuvačnim žlijezdama, ali u malim količinama.

Trippsin, amilaza i lipaza najvažnije su tvari u probavnom traktu. U nedostatku barem jednog od njih, probava hrane uvelike je poremećena..

Osim što sudjeluje u probavi, enzim tripsin vrlo je učinkovit u liječenju različitih bolesti:

  • pomaže smanjiti upalu u tijelu;
  • ubrzava zacjeljivanje opeklina, teških rana;
  • moći razgraditi mrtvo tkivo tako da proizvodi nekroze ne uđu u krvotok i uzrokuju intoksikaciju;
  • čini guste izlučevine, pražnjenje više tekućine;
  • olakšava ukapljivanje krvnih ugrušaka;
  • pomaže u liječenju bolesti s fibrinoznom upalom;
  • poboljšava uklanjanje gnojnih masa;
  • liječi teške ulcerativne oštećenja usne šupljine;

U neaktivnom stanju, ova je veza apsolutno sigurna.

Indikacije i kontraindikacije

Budući da tripsin ima tako izražena ljekovita svojstva, koristi se za proizvodnju lijekova.

Kao i svaka druga aktivna tvar bilo kojeg lijeka, i uporaba tripsina ima svoje indikacije i kontraindikacije za uporabu..

Kada koristite lijekove koji sadrže tripsin, strogo biste trebali slijediti liječničke preporuke i upute za uporabu proizvoda.

  1. Amorfan - može se primijeniti samo topički (na ograničenom području kože).
  2. Kristalni - proizvodi se u obliku bijelo-žutog praha, bez karakterističnog mirisa. Koristi se lokalno i za intramuskularnu primjenu.

Trippsin se proizvodi pod različitim imenima: Pax-Trypsin, Terridekase, Ribonuclease, Asperaza, Lysoamidase, Dalcex, Profesim, Irukson. Sve lijekove treba čuvati na suhom, tamnom mjestu, na temperaturi koja ne prelazi deset stupnjeva.

Indikacije za uporabu su:

  • upalne bolesti pluća i dišnih putova (bronhitis, pneumonija, eksudativna pleurisija);
  • bronhiektazije (prisutnost akutnih proširenja u bronhijama);
  • zaražene opekline i rane s gnojnim iscjedakom;
  • kronična upala srednjeg uha (otitis media);
  • gnojna upala frontalnog i maksilarnog sinusa;
  • upala koštane srži (osteomijelitis);
  • parodontna bolest;
  • blokada lakrimalnog kanala;
  • upala šarenice oka;
  • dekubitus;
  • komplikacije nakon operacije oka.

Kontraindikacije za upotrebu tripsina su:

  1. Alergijska reakcija na tripsin.
  2. Povećana prozračnost pluća ili emfizem.
  3. Zastoj srca.
  4. Distrofične i upalne promjene u jetri.
  5. Tuberkuloza.
  6. Bolest bubrega.
  7. Reaktivni pankreatitis.
  8. Poremećaji u sustavu koagulacije i antikoagulacije.
  9. Upalni procesi u bubrezima (nefritis).
  10. Hemoragična dijateza.

Koje nuspojave mogu biti nakon korištenja tripsina?

  • alergija;
  • cardiopalmus;
  • crvenilo i bol nakon intramuskularne injekcije;
  • hipertermija.

Uz to se u pacijentovom glasu može pojaviti promuklost..

Upute za uporabu lijeka

Kada se lokalno primjenjuju za liječenje suhih rana ili rana mrtvim tkivom, koriste se oblozi natopljeni tripsinom.

Da biste to učinili, morate otopiti 50 mg enzimskog pripravka u 50 mg fiziološke otopine (natrijev klorid ili 0,9% fiziološke otopine).

Obično koristite posebno dizajnirane troslojne maramice.

Nakon nanošenja komprese, fiksira se zavojem i ostavlja se dvadeset i četiri sata..

Intramuskularna primjena. 5 mg tripsina se razrijedi u 1-2 ml fiziološke otopine, lidokaina ili novokaina. Odrasli se ubrizgavaju dva puta dnevno, djeca samo jednom..

Intrapleuralna uporaba. Nakon uvođenja lijeka, ne možete dugo ostati u jednom položaju, jer to otežava razrjeđivanje sekreta. Obično nakon dva dana ta tajna izlazi kroz odvod..

Uporaba za udisanje. Udisanje tripsina provodi se pomoću inhalatora ili bronhoskopa. Nakon postupka, bolje je isprati nos ili usta toplom vodom (ovisno o tome na koji je način provedena).

U obliku kapi za oči. Treba ih kapnuti svakih 6-8 sati tijekom 3 dana..

Značajke uporabe tripsina:

  1. Tripsin je zabranjeno primjenjivati ​​na rane koje krvare.
  2. Ne može se koristiti za liječenje raka, osobito s područjima ulceracije tkiva.
  3. Ne može se davati intravenski.
  4. Pri liječenju male djece izrađuje se individualna shema.
  5. Trudnice ili dojeće žene trebaju uzimati ovaj lijek samo ako je rizik od njegove smrti ili smrti fetusa vrlo značajan.

Farmakokinetika, tj. raspodjela lijeka u tijelu još nije proučena. Poznato je samo da se kada pas uđe u tijelo, tripsin veže na alfa-makroglobuline i alfa-1-antitripsin (njegov inhibitor).

Recenzije lijekova

Trenutno postoji ogroman broj pozitivnih recenzija o pripravcima koji sadrže tripsin. Spektar njegove primjene osobito je širok u oftalmologiji. Uz pomoć njega liječe se krvarenja, adhezije, upalni i distrofični procesi šarenice, jer ove patologije, u nedostatku odgovarajuće terapije, mogu dovesti do nepovratne sljepoće. U liječenju je vrlo učinkovito kombinirati enzimske pripravke s antialergijskim lijekovima, antibioticima, hormonima, lijekovima protiv glaukoma, što značajno povećava brzinu regeneracije tkiva.

Tripsin je mnogima pomogao ublažiti tijek bolesti zglobova, poput artritisa, poliartritisa, artroze, reumatskih lezija. Ublažava bol, suzbija upale, obnavlja čitav raspon pokreta.

U slučaju velikih ozljeda, dubokih posjekotina, opeklina, enzim omogućava da, barem, ublaži opće blagostanje žrtve, a u budućnosti ubrzava ozdravljenje.

Prosječna cijena lijekova s ​​tripsinom u Rusiji kreće se od 500 rubalja.

Trippsin u analizama

U krvi se određuje takozvani "imunoreaktivni" tripsin zajedno s tvari koja suzbija njegovo djelovanje - alfa-1-antitripsin. Norma tripsina je 1-4 µmol / ml.min. Njegov porast može se primijetiti kod akutne upale gušterače, onkoloških procesa u njoj, kod cistične fibroze, kroničnog zatajenja bubrega, a može pratiti i tijek virusnih bolesti. Smanjenje količine enzima može ukazivati ​​na dijabetes melitus tipa 1 ili na gore navedene bolesti, ali u kroničnim oblicima i na kasnijim fazama.

Uz krvni test, pacijentima se često propisuje koprogram. Ne preporučuje se uzimanje antibiotika 3 dana prije ovog testa. Kod dešifriranja tripsin u izmetu možda neće biti otkriven. To je često znak cističnih fibrotičkih procesa u gušterači. Nagli pad u njemu opažen je kod cistične fibroze, ali to ni na koji način ne znači da je dijagnoza potvrđena, a za pojašnjenje su potrebna dodatna istraživanja. Trenutno se vjeruje da određivanje aktivnosti tripsina u izmetu ne pokazuje praktički ništa..

Kratke informacije o tripsinu i drugim enzimima nalaze se u videu u ovom članku..

Cistična fibroza: definicija, dijagnostički kriteriji, terapija. Nacionalni konsenzus

Izdavač

2. Dijagnoza cistične fibroze

Pravovremena dijagnoza cistične fibroze koja u većini slučajeva omogućava rani početak terapije, uključujući u pretkliničkoj fazi, poboljšava prognozu bolesti, povećava učinkovitost liječenja i sprječava razvoj teških komplikacija, značajno kašnjenje u fizičkom razvoju, a u nekim slučajevima i nepovratne promjene u plućima. Rana dijagnoza omogućuje obitelji pravovremeno rješavanje potrebnih pitanja koja se odnose na rođenje zdravog djeteta (genetsko savjetovanje, prenatalna dijagnoza CF-a u kasnijim trudnoćama) [1].

Dijagnostika CF uključuje:

I) dijagnostika neonatalnim skriningom (prije kliničkih manifestacija ili na njegovom početku) [2];

II) dijagnostika u prisutnosti kliničkih manifestacija [1]:

• pacijenti iz različitih rizičnih skupina s karakterističnim kliničkim manifestacijama (tablica 2-4) koji nisu bili uključeni u program probira neonatalne CF;

• bolesnici s lažno negativnim rezultatima neonatalnog probira s kliničkim manifestacijama bolesti;

• pacijenti s neonatalnom hipertripsinogenemijom koji nisu dobili znojni test;

III) dijagnostika među rodbinom pacijenata;

Iv) prenatalna dijagnoza;

V) preimplantacijska dijagnoza.

Dijagnostički kriteriji za CF

Za rješavanje problema dijagnoze CF-a, uključujući njegove atipične oblike, razvijeni su kriteriji prema kojima je za CF potrebno prisustvo karakterističnog kliničkog sindroma plus dokaz bilo kakve disfunkcije klornog kanala [3].

Uzimajući u obzir sav znanstveni napredak u razumijevanju prirode cistične fibroze i bolesti povezanih s CF-om u posljednjih 10 godina [4, 5], u 2013. skupina stručnjaka iz Europskog društva za cističnu fibrozu, pod vodstvom Carla Castellanija, pripremila je nove dijagnostičke standarde u izdanju Alana R Smyth i Scott Bell (https://www.ecfs.eu/ecfs-standards-care/introduction) (Slika 1).

Shema 1. Dijagnostički kriteriji za cističnu fibrozu ECFS, 2013 [6]

Znojni test pozitivan

dvije patogene mutacije u CFTR genu u trans 6, uzrokujući CF (prema CFTR-2 bazi podataka, http://www.cftr2.org)

od rođenja ili kasnije karakteristični klinički znakovi, uključujući (ali nisu ograničeni na) difuzne bronhiektazije, kulturu pljuvačke patogene mikroflore koja je značajna za CF (posebno Pseudomonas aeruginosa), egzokrinu insuficijenciju gušterače, sindrom gubitka soli, opstruktivnu azoospermiju (muškarci)

I. Neonatalni probir

Od lipnja 2006. u većini regija Ruske Federacije, a od siječnja 2007. u svim konstitutivnim entitetima Ruske Federacije, u okviru nacionalnog prioritetnog projekta „Zdravlje“, provodi se masovni probir novorođenčadi na pet nasljednih bolesti, uključujući cističnu fibrozu..

Većina postojećih shema probira temelji se na utvrđivanju razine imunoreaktivnog tripsinogena (IRT) u krvi novorođenčadi u prvom tjednu života, što je vrlo osjetljiv (90-95%), ali nespecifičan znak. U populaciji se neonatalna hipertripsinogenemija novorođenčadi nalazi u 5-10 djece od 1000 zdrave novorođenčadi. Povećanje razine imunoreaktivnog tripsinogena u CF nastaje kao posljedica začepljenja kanala gušterače gušterače viskoznim sekretom, što sprječava prodiranje tripsina u lumen tankog crijeva, gdje se normalno pretvara u tripsin. To dovodi do oslobađanja tripsina u krv [7].

Protokol probira u Ruskoj Federaciji uključuje 3 obvezna stadija: IRT, IRT ponovno testiranje (osjetljivost veća od 96%, specifičnost - ne manja od 99,8%) [8], znojni test (shema 2). U prvoj fazi određuje se razina IRT-a u krvi novorođenčadi (4-5. Dan - u punoljetnosti, 7-8. Dan - u prijevremeno rođene djece). Uzimanje uzoraka krvi vrši se sukladno Naredbi Ministarstva zdravlja i socijalnog razvoja od 22.03.2006. Br. 185 "O masovnom pregledu novorođene djece na nasljedne bolesti." Svi zahtjevi za primanje, skladištenje i otpremu uzoraka krvi moraju se strogo pridržavati. U uzorcima krvi IRT je nestabilan, pa ih se ne preporučuje skladištiti i transportirati dulje od 14 dana. Kontaminacija suvih krvnih mrlja izmetom novorođenčeta, što dovodi do lažno pozitivnih rezultata, neprihvatljivo je [9]. Ako je prag razine IRT-a prekoračen, 21.-28. Dan života provodi se ponovno testiranje. Dopuštena je evaluacija IRT-a u uzorcima uzetim najkasnije 8 tjedana života jer se njegova aktivnost može smanjiti i dijagnostička vrijednost studije izgubiti [10, 11]. U pravilu, u slučaju lažno pozitivnih rezultata do kraja prvog mjeseca, inicijalno povišeni pokazatelji RTI smanjuju se za razliku od pokazatelja djece s cističnom fibrozom. Međutim, izuzeci su mogući [12]. Ako se iz nekog razloga prvi uzorak krvi za utvrđivanje RTI uzme nakon 21 dana, ali prije 8 tjedana, tada se kao prag uzima vrijednost za ponovno testiranje (40 ng / ml). Ako je uzet uzorak krvi nakon 8 tjedana, a je IKT iznad praga, dijete treba uputiti u Centar za cističnu fibrozu na test znojenja. U slučaju normalnog RTI nakon 8 tjedana, ovaj se rezultat ne može uzeti u obzir radi isključenja djeteta iz rizične skupine. U ovom slučaju treba navesti da nije novorođenče probir na cističnu fibrozu [13]. Na zahtjev roditelja, takvo dijete mora imati test znojnice..

Shema 2. Algoritam za neonatalni probir za CF u Ruskoj Federaciji

Znojni test pouzdana je metoda za dijagnozu CF kod gotovo 98% bolesnika [14]. Gibson-Cook određivanje klorida znoja još uvijek se smatra "zlatnim standardom" [15]. U mnogim se centrima određivanje provodnosti znoja koristi kao znojni test pomoću Macroduct sustava za prikupljanje i analizu znoja u kombinaciji sa analizatorom znoja-Chek, kao i sa sustavom Vescor Nanoduct (SAD), razvijenim posebno za pregled novorođenčadi. Određivanje koncentracije klorida moguće je iz znojne tekućine prikupljene sustavom za prikupljanje i analizu znoja Macroduct. Brojne strane studije, dugogodišnje rusko iskustvo pokazuju dobru povezanost između određivanja vodljivosti i koncentracije klorida [16, 17, 18, 19, 20]. U praksi je kombinirana uporaba tehnika optimalna. U svim sumnjivim slučajevima, kada se dobiju ponovljeni granični rezultati provodljivosti znoja, kvantitativni Gibson-Cook test treba obaviti u laboratoriju s dovoljno iskustva u takvim studijama [6]. Ako metoda za određivanje klorida znoja nije dostupna, potrebno je uz opetovana mjerenja vodljivosti znoja provesti cjelovit pregled pacijenta, uključujući DNK dijagnostiku, fekalnu elastazu itd. Važno je zapamtiti da se provodnost znoja određuje ukupnošću svih iona prisutnih u tekućini znojnice (kalij, natrij, klor, bikarbonat, amonij itd.), a dobiveni rezultat premašuje pravu koncentraciju klorida [16, 17].

Znojni test može se provesti na djetetu u dobi od 48 sati i težine najmanje 2 kg [21-23]. Prevremene bebe imaju tendenciju znojenja s nižim stopama u odnosu na novorođene. Vrijeme sakupljanja znoja ne smije biti veće od 30 minuta, minimalna dopuštena količina znoja je 75 mg (15 µl u Macroduct sakupljaču), brzina znojenja bi trebala biti najmanje 1 g / m2 / min [9]. Obavezno je temeljito prethodno čišćenje pacijentove kože, uključujući pranje sapunom i naknadno liječenje alkoholom bez dodavanja klora. Nemojte nanositi losione i ulja na kožu prije ispitivanja. Posebnu pozornost treba posvetiti pripremi kože kod pacijenata koji su duže vrijeme u bolnici..

Preporučuje se uzeti u obzir razine klorida (Gibson-Cook test) koje ne prelaze 60 mmol / l, a provodljivost znoja> 80 mmol / l kao normalne pokazatelje (tablica 1) [9, 5, 17, 18, 23].

Tablica 1. Interpretacija rezultata ispitivanja znojenja

Rezultati ispitivanja znoja

Mogući uzroci rezultata ispitivanja prekograničnog znoja:

1. Individualne karakteristike u ljudi bez cistične fibroze, posebno u odraslih.

2. Nepravilna priprema za uzorak.

3. Prijenos "mekih" mutacija u cističnoj fibrozi.

Stoga pacijenti s graničnim rezultatima ispitivanja znojenja (kloridi 30-59 mmol / L i / ili vodljivost 50-79 mmol / L) predstavljaju stvarne poteškoće u dijagnozi..

• primjena nekoliko metoda za određivanje klorida znoja; ponovljena ispitivanja;

• napredna analiza DNK (sekvenciranje gena);

• produljeni klinički, laboratorijski i instrumentalni pregled: koprologija (uključujući određivanje fekalne elastaze), elektroliti u biokemijskom ispitivanju krvi, kultura ispljuvaka / bris iz stražnje stijenke ždrijela, rendgen prsa, sinusi, spermogram;

• promatranje u Centru za cističnu fibrozu do konačne odluke o dijagnozi. Pacijenti se ne uklanjaju s registra dok se dijagnoza ne isključi;

• u brojnim europskim centrima za potvrđivanje oštećenja transporta iona koristi se metoda utvrđivanja razlike u nazalnim potencijalima ili mjerenje električne struje u crijevnoj biopsiji [23, 24, 25], što odražava disfunkciju kanala klora. Obje metode se temelje na električnoj prirodi transporta iona i vrlo su informativne za dijagnozu CF.

Trenutno se ove metode ne koriste u Ruskoj Federaciji..

Lažno pozitivni i lažno negativni rezultati ispitivanja testa

Prilikom provođenja testa znojenja moguće je dobiti lažno pozitivne (do 15%) i lažno negativne (do 12%) rezultate. To može biti posljedica kako tehničkih pogrešaka, tako i fizioloških karakteristika pacijenta [26].

Znojni test može dati lažno negativne rezultate u djece sa CF, uz prisutnost edema bez proteina, nakon čega eliminacija postaje pozitivna. Potrebno je zapamtiti mogućnost dobivanja negativnog rezultata testa znojenja kod bolesnika s CF, osobito kod homo- ili heterozigotnih nosača nekih mutacija CFTR-a, kod kojih je funkcija klorovih kanala djelomično sačuvana (na primjer, 3849 + 10 kb C> T, E92K) [27-29].

S druge strane, lažno pozitivan test može se dobiti kod pacijenata s različitim stanjima. Međutim, većina ovih stanja ima vrlo karakterističnu kliničku sliku i njihova učestalost u populaciji je mala [30].

Tablica 2 navodi stanja koja ponekad prate porast klorida znojnice. Treba imati na umu da su ove situacije izuzetno rijetke, a pozitivan znojni test vrlo je specifičan test za dijagnozu CF..

Tablica 2. Ostali uvjeti u kojima test znoja može biti pozitivan i graničan

• Sindrom stečene imunodeficijencije (AIDS)